研究與開(kāi)發(fā)

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我公司由國(guó)內(nèi)外一大批教授領(lǐng)銜的諾優(yōu)生物是一家致力于多肽類(lèi)試劑和抗體服務(wù)的集研究開(kāi)發(fā)生產(chǎn)于一體的高新科技企業(yè),匯集了五位博士組成科研團(tuán)隊(duì)以及20多位有著多年合成經(jīng)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)員,立志研發(fā)高品質(zhì)的高難度的高成功率的生物試劑產(chǎn)品,他們有著同樣的夢(mèng)想,充滿激情。
若是您有多肽合成這方面的需求,歡迎隨時(shí)和我公司聯(lián)系,我公司在多肽的高難度修飾上面有著很深的研究,目前可做的高難度修飾有膽固醇修飾,PNA多肽,小分子修飾肽,訂書(shū)肽,多巴修飾,Nota修飾,三對(duì)二硫鍵定位修飾等等,以及普通的多肽修飾例如:環(huán)肽(首尾酰胺環(huán),二硫鍵成環(huán)等),磷酸化修飾肽(Ser,Thr,Tyr),脂肪酸修飾肽(Pal,Myr),生物素(Biotin)標(biāo)記肽,同位素標(biāo)記(N15,C13),熒光標(biāo)記肽(FAM,F(xiàn)ITC,Rodamine B, TAMRA等),復(fù)合抗原肽(MAP4,MAP8,MAP16分支),PEG修飾,甲基化修飾,側(cè)鏈修飾,蛋白偶聯(lián)(KLH,BSA,OVA),熒光淬滅基團(tuán)標(biāo)記(EDANS,DABCYL),以及含有D型氨基酸及各種氨基酸衍生物類(lèi)型的多肽等等。在此我公司特向所有客戶鄭重承諾:您們的要求就是我們的追求,您們的鼓勵(lì)就是我們的動(dòng)力,您們的想法就是我們的做法,您們的表情就是我們的心情。
1. 非放射性核素標(biāo)記
目前在非放射性核素標(biāo)記中,使用廣泛的仍然是C13,H2,因?yàn)槠涫褂冒踩?,放射性小?,F(xiàn)在有比較完全的非放射性標(biāo)記的氨基酸,可以按照正常的多肽合成方法將標(biāo)記好的氨基酸直接連接到多肽上。
2. 熒光標(biāo)記
熒光標(biāo)記由于沒(méi)有放射性,實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單。因此,目前在生物學(xué)研究中熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛,熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系,對(duì)于有游離羧基的采用的方法與接肽反應(yīng)相同,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。 在N端標(biāo)記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來(lái)形成熒光素,通常會(huì)伴有最后一個(gè)氨基酸的去除,但當(dāng)有一個(gè)間隔器如氨基己酸,或者是通過(guò)非酸性環(huán)境將目的肽從樹(shù)脂上切下來(lái)時(shí),這種情況可避免。
3. 生物素標(biāo)記
生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期應(yīng)用于免疫學(xué),并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級(jí)放大效應(yīng),并與熒光素、酶、同位素等免疫標(biāo)記技術(shù)有機(jī)地結(jié)合,使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進(jìn)一步提高。主要有用于標(biāo)記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對(duì)硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS最常用,當(dāng)然,也可以直接使用生物素也可以標(biāo)記,因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)上有個(gè)游離的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。
4. 磷酸肽合成
磷酸肽在生命過(guò)程中發(fā)揮重要作用,磷酸化的位置在多肽上的Ser,Thr,Tyr。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸,目前使用的都是單芐基磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的連接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法,但是目前采用該方法合成磷酸化也有缺點(diǎn),特別是在合成多磷酸化多肽或長(zhǎng)肽的時(shí)候,連接效率低,最后產(chǎn)品純度很低,對(duì)于這種磷酸化多肽,我們考慮采用后磷酸化方法,其合成過(guò)程就是在多肽合成結(jié)束后,選擇性脫去要標(biāo)記的氨基酸的側(cè)鏈保護(hù)基,對(duì)于Tyr,Thr可以直接使用側(cè)鏈不保護(hù)的氨基酸進(jìn)行反應(yīng),而Ser可以采用Fmoc-Ser(trt),在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化,采用雙芐基亞磷酰胺,四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體,連接到羥基上,隨后在過(guò)氧酸下氧化生成磷?;耆磻?yīng)。