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針對不同應用的抗體來設計不同的抗原是抗體開發(fā)的關鍵第一步?？乖?，是指能夠刺激機體產生（特異性）免疫應答，并能與免疫應答產物抗體和致敏淋巴細胞在體外結合，發(fā)生免疫效應（特異性反應）的物質?？乖幕咎匦杂袃煞N：
一是誘導免疫應答的能力，也就是免疫原性。
二是與免疫應答的產物發(fā)生反應，也就是抗原性。

通常用于制備抗體有：蛋白與多肽，其中多肽因其分子量較小，不具免疫原性，是一種半抗原，需要與大分子蛋白質載體結合后形成具有免疫原性的完全抗原。 具體通過基因合成、亞克隆和表達純化獲得蛋白制備抗體，還是通過設計、合成多肽并偶聯(lián)載體蛋白作為抗原制備抗體，需要根據抗體應用于什么實驗，以及您所能獲得的材料、信息來決定。

例如,CO-IP、FACS、NeutralizingBlocking以及Elisa法檢測天然蛋白等實驗，實驗過程中蛋白處于天然狀態(tài)，使用的抗體識別的一般是蛋白的構象表位和線性表位，采用蛋白作為抗原較為理想。而如果氨基酸序列已知，但是由于基因克隆或表達等原因得不到 抗原蛋白，或者僅需要得到針對抗原蛋白某幾個特定表位，獲特定修飾性位點的抗體，就可以采用多肽合成的方式得到抗原。 擁有國內領先的抗原制備技術和先進的儀器設備，可為客戶提供：（1）原核蛋白表達與純化服務，通過全基因合成和亞克隆，構建表達載體，利用不同的表達菌株與純化介質，最終獲得具有一定純度和濃度的高質量蛋白抗原。
（2）多肽合成和載體蛋白（KLH/BSA/OVA）偶聯(lián)服務。

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 原核蛋白表達

我公司已成功構建完整的各種蛋白表達技術平臺：包括原核蛋白表達與純化、酵母蛋白表達與純化、昆蟲細胞蛋白表達與純化、哺乳動物細胞蛋白表達與純化。根據客戶的需求，我們提供從基因合成，載體構建，基因表達，蛋白純化、檢測等一站式服務。為了保證蛋白純化的質量，諾優(yōu)生物建立了嚴格的產品質控體系及一整套完善的客戶服務流程、保密制度以確保為客戶提供優(yōu)質的產品及一流的服務。 我們的蛋白質團隊在優(yōu)化基因密碼子、表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取、特定蛋白純化系統(tǒng)的選擇、蛋白生產工藝的優(yōu)化等方面，擁有極其豐富的經驗?？梢詽M足客戶個性化的需求。

原核蛋白表達與純化

原核蛋白表達是將植物、動物、微生物等的目的基因插入合適載體后導入大腸桿菌表達出大量目的蛋白。這種方法在蛋白純化、定位及功能分析等方面都有應用。大腸桿菌用于 表達重組蛋白有以下優(yōu)點：易于生長和控制；易于培養(yǎng)，實驗耗費少；可選擇多種大腸桿菌菌株及與之匹配的具各種特性的質粒。原核蛋白表達系統(tǒng)是迄今為止最為成熟可靠的蛋白表達系統(tǒng)。 原核蛋白表達技術服務按步驟收費，您可以選擇從以下任意一步開始提供服務或僅選擇其中的單獨一步，詳細價格請垂詢。

如需前期分子生物學技術服務請參考相關內容。
服務特色：
1、一站式解決方案，從基因合成到蛋白表達純化，完成您的實驗設計。
2、技術成熟穩(wěn)定/方法手段齊全。
3、服務周期短。
原核蛋白表達（E. coli ）技術服務內容：
1、基因合成，
提供客戶：合成的基因及測序序列。
時間： 1~2
2、載體構建（表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取。）
擴增并抽提構建好的表達質粒。將表達質粒轉化到高效的E. coli表達菌株中。至少挑選數個陽性克隆于LB培養(yǎng)基中擴增并誘導表達目標蛋白。電泳檢測，菌株中目標蛋白的表達情況，并挑選合適的單克隆菌株用于目標蛋白的表達。
提供客戶：重組質粒的表達菌株及表達檢測報告。
時間： 1~2周
3、搖瓶培養(yǎng)重組細菌，誘導表達目標蛋白。
通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的純化標簽（Tag），再純化獲得所需的目標蛋白（可選，構建表達載體時需加入合適的蛋白酶切位點）。
諾優(yōu)生物科技有限公司會通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。 提供客戶：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒═ag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達95%以上。
時間： 2~3周
4、大規(guī)模蛋白制備。
蛋白生產工藝的優(yōu)化
提供客戶：合格的目標蛋白及服務報告。 
時間：協(xié)商
5、蛋白復性服務。
利用不同復性緩沖液的體系，對目標蛋白進行小量復性試驗提供復性后樣品供客戶檢測?？筛鶕蛻粢?，按照其中一種樣品的復性條件制備小量的復性蛋白。我公司可提供具體的復性緩沖液配方及復性工藝。
其他：除菌，凍干等進一步加工。
詳細檢測目標蛋白的質量。
提供客戶：加工后的最終產品及相關實驗和檢測報告。 

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酵母蛋白表達

我公司已成功構建完整的各種蛋白表達技術平臺：包括原核蛋白表達與純化、酵母蛋白表達與純化、昆蟲細胞蛋白表達與純化、哺乳動物細胞蛋白表達與純化。根據客戶的需求，我們提供從基因合成，載體構建，基因表達，蛋白純化、檢測等一站式服務。為了保證蛋白純化的質量，諾優(yōu)生物建立了嚴格的產品質控體系及一整套完善的客戶服務流程、保密制度以確保為客戶提供優(yōu)質的產品及一流的服務。 我們的蛋白質團隊在優(yōu)化基因密碼子、表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取、特定蛋白純化系統(tǒng)的選擇、蛋白生產工藝的優(yōu)化等方面，擁有極其豐富的經驗?？梢詽M足客戶個性化的需求。

酵母蛋白表達

重組蛋白表達與純化技術服務（P. Pichia表達系統(tǒng)）

目前成熟的表達體系包括：原核表達系統(tǒng)(大腸桿菌 E. coli表達系統(tǒng))、酵母表達系統(tǒng)(P. Pichia表達建立了嚴格的產品質控體系及一整套完善的客戶服務流程、保密制度以確保為客戶提供優(yōu)質的產品及一流的服務。技術服務按步驟收費，您可以選擇從以下任意一步開始提供服務或僅選擇其中的單獨一步，詳細價格請垂詢。

?酵母表達系統(tǒng)——步驟1. 目標基因亞克隆至酵母表達載體： 
擴增并抽提含有目標基因的載體質粒。
將目標基因亞克隆到合適的表達質粒上。
測序驗證構建質粒的準確性。
可提供表達載體：pPICZα和pPIC9K 
提供客戶：正確構建的重組表達質粒，含重組質粒的DH5α菌株及測序報告。 
服務周期：1周 
?酵母表達系統(tǒng)——步驟2. P. Pichia表達菌株電轉化： 
酶切線性化表達質粒。
將表達質粒通過電轉化到高效的P. Pichia表達菌株中。
利用蛋白酶去除不需要的純化標簽（Tag），再純化獲得所需的目標蛋白（可選，構建表達載體時需加入合適的蛋白酶切位點）。
通過PCR鑒定至少挑選5個陽性克隆。
可提供表達菌株：X33，GS115，KM71和SMD1168。 
提供客戶：PCR陽性克隆及PCR結果報告。 
時間：1周 
? 酵母表達系統(tǒng)——步驟3. P. Pichia表達菌株篩選： 
將5個陽性克隆于BMGY培養(yǎng)基中擴增，然后換至BMMY培養(yǎng)基中，并加入甲醇誘導表達目標蛋白。
SDS-PAGE電泳檢測培養(yǎng)上清中目標蛋白的表達情況，并挑選合適的單克隆菌株用于目標蛋白的表達。
如果培養(yǎng)上清中檢測不到表達，則通過將上清濃縮20倍作用再檢測，或通過Western-blot方法檢測目標蛋白表達（客戶需要提供相關抗體）。
提供客戶：任意一個客戶需要的陽性克隆菌株及表達篩選結果報告。 
時間：2周 
?酵母表達系統(tǒng)——步驟4. P. Pichia表達菌株表達優(yōu)化：
挑選20個陽性克隆進行常規(guī)表達篩選，并對其中表達最好菌株優(yōu)化表達條件。
對挑選出來的單克隆菌株，優(yōu)化培養(yǎng)及誘導條件（培養(yǎng)基，菌體密度，甲醇濃度，誘導時間等），提高目標蛋白的表達量。 
提供客戶：任意三個客戶需要的陽性克隆菌株及優(yōu)化表達條件結果報告。 
時間：2周 
?酵母表達系統(tǒng)——步驟5.目標蛋白表達及純化：
搖瓶培養(yǎng)1L重組酵母菌，誘導表達目標蛋白。
通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。 
提供客戶：純化好的目標蛋白1~10mg及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒═ag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。 
時間：2~3周 
?酵母表達系統(tǒng)——步驟6.目標蛋白的再加工及詳細檢測 
對生物學活性要求較高的純化后蛋白產品進行復性研究。
內毒素去除，除菌，凍干等進一步加工。
通過HPLC，質譜等方法詳細檢測目標蛋白的質量。 
服務內容： 
1.復性研究： 
利用多達18種不同復性緩沖液的體系，對目標蛋白進行小量復性試驗提供復性后樣品供客戶檢測。
可根據客戶要求，按照其中一種樣品的復性條件制備小量的復性蛋白。
可提供具體的復性緩沖液配方及復性工藝。
2.除內毒素
3.過濾除菌
4.凍干
5.HPLC檢測
6.質譜檢測
提供客戶：加工后的終產品及相關實驗和檢測報告。 
時間：1~2周 
?酵母表達系統(tǒng)——步驟7. 大規(guī)模制備 
提供客戶：合格的目標蛋白及服務報告。