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針對(duì)不同應(yīng)用的抗體來設(shè)計(jì)不同的抗原是抗體開發(fā)的關(guān)鍵第一步?？乖?，是指能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生（特異性）免疫應(yīng)答，并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體外結(jié)合，發(fā)生免疫效應(yīng)（特異性反應(yīng)）的物質(zhì)。抗原的基本特性有兩種：
一是誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的能力，也就是免疫原性。
二是與免疫應(yīng)答的產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)，也就是抗原性。

通常用于制備抗體有：蛋白與多肽，其中多肽因其分子量較小，不具免疫原性，是一種半抗原，需要與大分子蛋白質(zhì)載體結(jié)合后形成具有免疫原性的完全抗原。 具體通過基因合成、亞克隆和表達(dá)純化獲得蛋白制備抗體，還是通過設(shè)計(jì)、合成多肽并偶聯(lián)載體蛋白作為抗原制備抗體，需要根據(jù)抗體應(yīng)用于什么實(shí)驗(yàn)，以及您所能獲得的材料、信息來決定。

例如,CO-IP、FACS、NeutralizingBlocking以及Elisa法檢測(cè)天然蛋白等實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過程中蛋白處于天然狀態(tài)，使用的抗體識(shí)別的一般是蛋白的構(gòu)象表位和線性表位，采用蛋白作為抗原較為理想。而如果氨基酸序列已知，但是由于基因克隆或表達(dá)等原因得不到 抗原蛋白，或者僅需要得到針對(duì)抗原蛋白某幾個(gè)特定表位，獲特定修飾性位點(diǎn)的抗體，就可以采用多肽合成的方式得到抗原。 擁有國(guó)內(nèi)領(lǐng)先的抗原制備技術(shù)和先進(jìn)的儀器設(shè)備，可為客戶提供：（1）原核蛋白表達(dá)與純化服務(wù)，通過全基因合成和亞克隆，構(gòu)建表達(dá)載體，利用不同的表達(dá)菌株與純化介質(zhì)，最終獲得具有一定純度和濃度的高質(zhì)量蛋白抗原。
（2）多肽合成和載體蛋白（KLH/BSA/OVA）偶聯(lián)服務(wù)。

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 原核蛋白表達(dá)

我公司已成功構(gòu)建完整的各種蛋白表達(dá)技術(shù)平臺(tái)：包括原核蛋白表達(dá)與純化、酵母蛋白表達(dá)與純化、昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)與純化、哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)與純化。根據(jù)客戶的需求，我們提供從基因合成，載體構(gòu)建，基因表達(dá)，蛋白純化、檢測(cè)等一站式服務(wù)。為了保證蛋白純化的質(zhì)量，諾優(yōu)生物建立了嚴(yán)格的產(chǎn)品質(zhì)控體系及一整套完善的客戶服務(wù)流程、保密制度以確保為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及一流的服務(wù)。 我們的蛋白質(zhì)團(tuán)隊(duì)在優(yōu)化基因密碼子、表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建、融合對(duì)象和標(biāo)簽的選取、特定蛋白純化系統(tǒng)的選擇、蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化等方面，擁有極其豐富的經(jīng)驗(yàn)?？梢詽M足客戶個(gè)性化的需求。

原核蛋白表達(dá)與純化

原核蛋白表達(dá)是將植物、動(dòng)物、微生物等的目的基因插入合適載體后導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)出大量目的蛋白。這種方法在蛋白純化、定位及功能分析等方面都有應(yīng)用。大腸桿菌用于 表達(dá)重組蛋白有以下優(yōu)點(diǎn)：易于生長(zhǎng)和控制；易于培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)耗費(fèi)少；可選擇多種大腸桿菌菌株及與之匹配的具各種特性的質(zhì)粒。原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)是迄今為止最為成熟可靠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。 原核蛋白表達(dá)技術(shù)服務(wù)按步驟收費(fèi)，您可以選擇從以下任意一步開始提供服務(wù)或僅選擇其中的單獨(dú)一步，詳細(xì)價(jià)格請(qǐng)垂詢。

如需前期分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)參考相關(guān)內(nèi)容。
服務(wù)特色：
1、一站式解決方案，從基因合成到蛋白表達(dá)純化，完成您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
2、技術(shù)成熟穩(wěn)定/方法手段齊全。
3、服務(wù)周期短。
原核蛋白表達(dá)（E. coli ）技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
1、基因合成，
提供客戶：合成的基因及測(cè)序序列。
時(shí)間： 1~2
2、載體構(gòu)建（表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建、融合對(duì)象和標(biāo)簽的選取。）
擴(kuò)增并抽提構(gòu)建好的表達(dá)質(zhì)粒。將表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到高效的E. coli表達(dá)菌株中。至少挑選數(shù)個(gè)陽(yáng)性克隆于LB培養(yǎng)基中擴(kuò)增并誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。電泳檢測(cè)，菌株中目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況，并挑選合適的單克隆菌株用于目標(biāo)蛋白的表達(dá)。
提供客戶：重組質(zhì)粒的表達(dá)菌株及表達(dá)檢測(cè)報(bào)告。
時(shí)間： 1~2周
3、搖瓶培養(yǎng)重組細(xì)菌，誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。
通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的純化標(biāo)簽（Tag），再純化獲得所需的目標(biāo)蛋白（可選，構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需加入合適的蛋白酶切位點(diǎn)）。
諾優(yōu)生物科技有限公司會(huì)通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。 提供客戶：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)95%以上。
時(shí)間： 2~3周
4、大規(guī)模蛋白制備。
蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化
提供客戶：合格的目標(biāo)蛋白及服務(wù)報(bào)告。 
時(shí)間：協(xié)商
5、蛋白復(fù)性服務(wù)。
利用不同復(fù)性緩沖液的體系，對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行小量復(fù)性試驗(yàn)提供復(fù)性后樣品供客戶檢測(cè)?？筛鶕?jù)客戶要求，按照其中一種樣品的復(fù)性條件制備小量的復(fù)性蛋白。我公司可提供具體的復(fù)性緩沖液配方及復(fù)性工藝。
其他：除菌，凍干等進(jìn)一步加工。
詳細(xì)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的質(zhì)量。
提供客戶：加工后的最終產(chǎn)品及相關(guān)實(shí)驗(yàn)和檢測(cè)報(bào)告。 

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酵母蛋白表達(dá)

我公司已成功構(gòu)建完整的各種蛋白表達(dá)技術(shù)平臺(tái)：包括原核蛋白表達(dá)與純化、酵母蛋白表達(dá)與純化、昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)與純化、哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)與純化。根據(jù)客戶的需求，我們提供從基因合成，載體構(gòu)建，基因表達(dá)，蛋白純化、檢測(cè)等一站式服務(wù)。為了保證蛋白純化的質(zhì)量，諾優(yōu)生物建立了嚴(yán)格的產(chǎn)品質(zhì)控體系及一整套完善的客戶服務(wù)流程、保密制度以確保為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及一流的服務(wù)。 我們的蛋白質(zhì)團(tuán)隊(duì)在優(yōu)化基因密碼子、表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建、融合對(duì)象和標(biāo)簽的選取、特定蛋白純化系統(tǒng)的選擇、蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化等方面，擁有極其豐富的經(jīng)驗(yàn)。可以滿足客戶個(gè)性化的需求。

酵母蛋白表達(dá)

重組蛋白表達(dá)與純化技術(shù)服務(wù)（P. Pichia表達(dá)系統(tǒng)）

目前成熟的表達(dá)體系包括：原核表達(dá)系統(tǒng)(大腸桿菌 E. coli表達(dá)系統(tǒng))、酵母表達(dá)系統(tǒng)(P. Pichia表達(dá)建立了嚴(yán)格的產(chǎn)品質(zhì)控體系及一整套完善的客戶服務(wù)流程、保密制度以確保為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及一流的服務(wù)。技術(shù)服務(wù)按步驟收費(fèi)，您可以選擇從以下任意一步開始提供服務(wù)或僅選擇其中的單獨(dú)一步，詳細(xì)價(jià)格請(qǐng)垂詢。

?酵母表達(dá)系統(tǒng)——步驟1. 目標(biāo)基因亞克隆至酵母表達(dá)載體： 
擴(kuò)增并抽提含有目標(biāo)基因的載體質(zhì)粒。
將目標(biāo)基因亞克隆到合適的表達(dá)質(zhì)粒上。
測(cè)序驗(yàn)證構(gòu)建質(zhì)粒的準(zhǔn)確性。
可提供表達(dá)載體：pPICZα和pPIC9K 
提供客戶：正確構(gòu)建的重組表達(dá)質(zhì)粒，含重組質(zhì)粒的DH5α菌株及測(cè)序報(bào)告。 
服務(wù)周期：1周 
?酵母表達(dá)系統(tǒng)——步驟2. P. Pichia表達(dá)菌株電轉(zhuǎn)化： 
酶切線性化表達(dá)質(zhì)粒。
將表達(dá)質(zhì)粒通過電轉(zhuǎn)化到高效的P. Pichia表達(dá)菌株中。
利用蛋白酶去除不需要的純化標(biāo)簽（Tag），再純化獲得所需的目標(biāo)蛋白（可選，構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需加入合適的蛋白酶切位點(diǎn)）。
通過PCR鑒定至少挑選5個(gè)陽(yáng)性克隆。
可提供表達(dá)菌株：X33，GS115，KM71和SMD1168。 
提供客戶：PCR陽(yáng)性克隆及PCR結(jié)果報(bào)告。 
時(shí)間：1周 
? 酵母表達(dá)系統(tǒng)——步驟3. P. Pichia表達(dá)菌株篩選： 
將5個(gè)陽(yáng)性克隆于BMGY培養(yǎng)基中擴(kuò)增，然后換至BMMY培養(yǎng)基中，并加入甲醇誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。
SDS-PAGE電泳檢測(cè)培養(yǎng)上清中目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況，并挑選合適的單克隆菌株用于目標(biāo)蛋白的表達(dá)。
如果培養(yǎng)上清中檢測(cè)不到表達(dá)，則通過將上清濃縮20倍作用再檢測(cè)，或通過Western-blot方法檢測(cè)目標(biāo)蛋白表達(dá)（客戶需要提供相關(guān)抗體）。
提供客戶：任意一個(gè)客戶需要的陽(yáng)性克隆菌株及表達(dá)篩選結(jié)果報(bào)告。 
時(shí)間：2周 
?酵母表達(dá)系統(tǒng)——步驟4. P. Pichia表達(dá)菌株表達(dá)優(yōu)化：
挑選20個(gè)陽(yáng)性克隆進(jìn)行常規(guī)表達(dá)篩選，并對(duì)其中表達(dá)最好菌株優(yōu)化表達(dá)條件。
對(duì)挑選出來的單克隆菌株，優(yōu)化培養(yǎng)及誘導(dǎo)條件（培養(yǎng)基，菌體密度，甲醇濃度，誘導(dǎo)時(shí)間等），提高目標(biāo)蛋白的表達(dá)量。 
提供客戶：任意三個(gè)客戶需要的陽(yáng)性克隆菌株及優(yōu)化表達(dá)條件結(jié)果報(bào)告。 
時(shí)間：2周 
?酵母表達(dá)系統(tǒng)——步驟5.目標(biāo)蛋白表達(dá)及純化：
搖瓶培養(yǎng)1L重組酵母菌，誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。
通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。 
提供客戶：純化好的目標(biāo)蛋白1~10mg及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。 
時(shí)間：2~3周 
?酵母表達(dá)系統(tǒng)——步驟6.目標(biāo)蛋白的再加工及詳細(xì)檢測(cè) 
對(duì)生物學(xué)活性要求較高的純化后蛋白產(chǎn)品進(jìn)行復(fù)性研究。
內(nèi)毒素去除，除菌，凍干等進(jìn)一步加工。
通過HPLC，質(zhì)譜等方法詳細(xì)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的質(zhì)量。 
服務(wù)內(nèi)容： 
1.復(fù)性研究： 
利用多達(dá)18種不同復(fù)性緩沖液的體系，對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行小量復(fù)性試驗(yàn)提供復(fù)性后樣品供客戶檢測(cè)。
可根據(jù)客戶要求，按照其中一種樣品的復(fù)性條件制備小量的復(fù)性蛋白。
可提供具體的復(fù)性緩沖液配方及復(fù)性工藝。
2.除內(nèi)毒素
3.過濾除菌
4.凍干
5.HPLC檢測(cè)
6.質(zhì)譜檢測(cè)
提供客戶：加工后的終產(chǎn)品及相關(guān)實(shí)驗(yàn)和檢測(cè)報(bào)告。 
時(shí)間：1~2周 
?酵母表達(dá)系統(tǒng)——步驟7. 大規(guī)模制備 
提供客戶：合格的目標(biāo)蛋白及服務(wù)報(bào)告。