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放射性同位素標(biāo)記蛋白

放射性同位素標(biāo)記法檢測脂肪等組織中脂蛋白脂肪酶活性 脂蛋白脂肪酶活性測定國內(nèi)常用滴定法和比色法,但這兩種方法都不夠靈敏和可靠. 為準(zhǔn)確檢測脂蛋白脂肪酶的活性,在中國首次建立了放射性同位素標(biāo)記法, 并用此方法檢測了基因體外表達的脂蛋白脂肪酶,以及攝食條件下C57小鼠肝素后血漿中及心肌 、脂肪和肝臟組織中的脂蛋白脂肪酶的活性

Radiolabeled proteins放射性同位素標(biāo)記蛋白 

放射性同位素標(biāo)記法檢測脂肪等組織中脂蛋白脂肪酶活性

脂蛋白脂肪酶活性測定國內(nèi)常用滴定法和比色法,但這兩種方法都不夠靈敏和可靠.為準(zhǔn)確檢測脂蛋白脂肪酶的活性,在中國首次建立了放射性同位素標(biāo)記法,并用此方法檢測了基因體外表達的脂蛋白脂肪酶,以及攝食條件下C57小鼠肝素后血漿中及心肌、脂肪和肝臟組織中的脂蛋白脂肪酶的活性. 測定使用含3H標(biāo)記三油酸甘油酯的甘油乳劑為底物.標(biāo)本與底物37℃孵育反應(yīng)后通過抽提將甘油酯與游離脂肪酸分開.脂解產(chǎn)生的游離脂肪酸的放射活性與標(biāo)本中脂肪酶的活性成正比.表達人脂蛋白脂肪酶的重組腺病毒感染培養(yǎng)的293A細胞后, 肝素后培養(yǎng)液中表達很高的脂蛋白脂肪酶活性.5只小鼠肝素后血漿及心肌、脂肪組織中脂蛋白脂肪酶活性檢測結(jié)果均值分別為314. 3U/L以及349和61mU/g.結(jié)果表明,放射性同位素標(biāo)記法用于脂蛋白脂肪酶基因表達的研究靈敏、準(zhǔn)確和穩(wěn)定.小鼠血漿和組織標(biāo)本脂蛋白脂肪酶活性檢測為今后利用小鼠進一步研究脂蛋白脂肪酶提供了一些資料.