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手工固相多肽合成所需試劑和耗材的內(nèi)容如下


一、器材

反應(yīng)管、多胎合成振蕩器、多孔加熱器、真空泵、洗瓶(六個(gè))、微型試管

二、檢測(cè)試劑

a.茚三酮、KCN、苯酚

b.乙醛、對(duì)四氯苯醌(C6O2Cl4

三、縮合

aHBTUNMM(N-甲基嗎啡啉)

bHOBt、DIC

四、洗、溶劑

DMFDCM、甲醇、乙醇

五、脫保護(hù)

哌啶(20%/DMF

六、裂解劑

TFA、EDTTIS、苯甲硫醚

七、結(jié)第一個(gè)氨基酸殘基

乙酸酐、吡啶、DMAP  

八、 樹脂和保護(hù)氨基酸

   進(jìn)口wang樹脂和保護(hù)氨基酸


手工固相多肽合成操作步驟(的內(nèi)容如下)

 

一.樹脂溶漲
將樹脂放入反應(yīng)管中,加DMF(15ml/g),30min

二.脫保護(hù)
去掉DMF,加20%哌啶DMF溶液(15ml/g),5min,去掉再加20%哌啶DMF溶液(15ml/g),15min

三.檢測(cè)
抽掉哌啶溶液,取十幾粒樹脂,用乙醇洗三次,加入茚三酮,KC N,苯酚溶液各一滴,105℃-110℃加熱5min

四.洗
DMF(10ml/g)兩次,甲醇(10ml/g)兩次,DMF(10ml/g)兩次

五.縮合

方法a:保護(hù)氨基酸三倍過量,HBTU三倍過量,均用盡量少DMF溶解,加入反應(yīng)管,立刻假如NMM十倍過量.反應(yīng)30min.

方法b:保護(hù)氨基酸三倍過量,HOBt三倍過量,均用盡量少DMF溶解,加入反應(yīng)管,立刻假如DIC三倍過量.反應(yīng)30min.

六.洗
DMF(10ml/g)一次,甲醇(10ml/g)兩次,DMF(10ml/g)兩次

. 重復(fù)二至六操作

八.最后一次洗滌
DMF(10ml/g)兩次,甲醇(10ml/g)兩次,DMF(10ml/g)兩次, DCM(10ml/g)兩次

九.裂解

配制裂解液(10ml/gTFA 94.5%;水2.5%;EDT 2.5%;TIS 1%

120min  (注:g是樹脂的單位級(jí))

十.吹干洗滌

將裂解液用氮?dú)獗M量吹干,用乙醚洗六次,然后常溫?fù)]干.