技術(shù)支持

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A法:在弱酸的條件下氧化
1.用醋酸水溶解多肽,比例應(yīng)需要而定
2.稀釋到多肽濃度為0.5-1.6mg/ml,最終醋酸的濃度為5%
3.用碳酸氨調(diào)節(jié)PH值到6
4.加DMSO(10-20%體積)在25℃,反應(yīng)2-3天,(HPLC或Ellman test監(jiān)測)
5.稀釋最終溶液到TFA為0.05%,乙腈為5%
6.上反相柱除掉DMSO和其他雜質(zhì)
B法:在堿性條件下氧化
1.溶解多肽在0.01M磷酸鹽反沖液中,PH值7.5,獲得最終多肽濃度是大約1mg/ml
2.加DMSO(1%體積),在25℃下反應(yīng)
3.HPLC或Ellman test監(jiān)測,1-2天完成,凍干
DMSO酸性氧化法合成二硫鍵
具體操作步驟
1.稱取somatostatin(生長抑素)純品11mg
2.加7.6 ml水完全溶解
3.加AcoH 0.4ml,使AcoH的濃度為5%。
4.加入碳酸氨15mg,使PH值調(diào)節(jié)到6
5.加入DMSO 1ml,把溶液放在搖床上開始反應(yīng),反應(yīng)時(shí)間為24小時(shí)左右。
6.加入3.5ul的TFA,和250ul的乙腈
7.反向柱純化