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您現(xiàn)在所在的位置:首頁 > 技術(shù)支持DMSO氧化法合成二硫鍵

A法:在弱酸的條件下氧化

1.用醋酸水溶解多肽,比例應(yīng)需要而定

2.稀釋到多肽濃度為0.5-1.6mg/ml,最終醋酸的濃度為5%

3.用碳酸氨調(diào)節(jié)PH值到6

4.DMSO10-20%體積)在25℃,反應(yīng)2-3天,(HPLCEllman test監(jiān)測)

5.稀釋最終溶液到TFA0.05%,乙腈為5%

6.上反相柱除掉DMSO和其他雜質(zhì)

 

B法:在堿性條件下氧化

1.溶解多肽在0.01M磷酸鹽反沖液中,PH7.5,獲得最終多肽濃度是大約1mg/ml

2.DMSO1%體積),在25℃下反應(yīng)

3.HPLCEllman test監(jiān)測,1-2天完成,凍干

 

DMSO酸性氧化法合成二硫鍵

 

具體操作步驟

1.稱取somatostatin(生長抑素)純品11mg

2.7.6 ml水完全溶解

3.AcoH 0.4ml,使AcoH的濃度為5%

4.加入碳酸氨15mg,使PH值調(diào)節(jié)到6

5.加入DMSO 1ml,把溶液放在搖床上開始反應(yīng),反應(yīng)時(shí)間為24小時(shí)左右。

6.加入3.5ulTFA,和250ul的乙腈

7.反向柱純化